Phosphorylierungsmodifikation
Die Erforschung phosphorylierter Proteine und Peptide kann Menschen dabei helfen, den Mechanismus des oben genannten Prozesses aufzuklären und die Natur der Lebensaktivitäten besser zu verstehen. In den letzten Jahren hat die Untersuchung der Proteinphosphorylierung mit der kontinuierlichen Weiterentwicklung der Proteomics-Technologie immer größere Aufmerksamkeit erhalten. Viele natürliche Toxine und Krankheitserreger üben ihre Wirkung auch dadurch aus, dass sie den Phosphorylierungsstatus intrazellulärer Proteine verändern.
Phosphorylierte Polypeptide beziehen sich hauptsächlich auf Ser, Tyr und Thr. Die Hydroxylgruppe der Seitenkette des Rests wird in ein saures Phosphatpolypeptid umgewandelt. Bisher umfasst die Phosphorylierungsmodifikation von Polypeptiden hauptsächlich Post--Phosphorylierungsmethoden und zwei Synthesemethoden:
Bei der Modifikation mit der Monomermethode ist es aufgrund der sterischen Hinderung durch die größere Seitenkettenmodifikationsgruppe schwierig, die phosphorylierte Aminosäure mit der Peptidkette zu kondensieren, und die anschließende Einführung der Aminosäure wird schwieriger. Insbesondere wenn es mehrere Modifikationen der Phosphorylierungsstelle enthält, wird die Synthese äußerst schwierig, und das Endprodukt weist komplexe Komponenten auf, ist schwer zu trennen und weist eine äußerst geringe Ausbeute auf. Wenn daher mehrere Stellen in der Peptidkette phosphoryliert werden, kann die Methode nach der -Phosphorylierung in Betracht gezogen werden. Der Hauptsyntheseprozess besteht darin, die Seitenkettenschutzgruppen der zu markierenden Aminosäuren nach Abschluss der Polypeptidsynthese selektiv zu entfernen. Für Tyr, Thr können Aminosäuren mit ungeschützten Seitenketten direkt für die Reaktion verwendet werden. Seitenkettenschutzgruppe bei 1 % TFA/DCM. Sie kann unter bestimmten Bedingungen quantitativ entfernt werden. Während der Post-Phosphorylierung kann Bisbenzylphosphoramidit verwendet werden. Das Tetrazol erzeugt das aktive Phosphoramidit-Tetrazol-Zwischenprodukt, das mit der Hydroxylgruppe verbunden wird und dann unter Peroxysäurebedingungen oxidiert wird, um eine Phosphorylgruppe zu erzeugen, um die Reaktion abzuschließen.
- Wir bieten pSer-, pTyr-, pThr- und D-pSer-, D-pTyr-, D-pThr-Phosphorylierungsmodifikationsdienste an.
- Phosphorylierungsmodifikationen von 2 Stellen, 3 Stellen, 4 Stellen und 5 Stellen können gleichzeitig durchgeführt werden.
Phosphorylierte PeptideSynthetischer Fall (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) warten)
1. Es gibt 4 Phosphorylierungsstellen in der Sequenz (xxxpSpTxxxpSxxxpTx). Die Reinheit beträgt 95 % und der Abschlusszyklus beträgt 3 Wochen.
