Methoden zur Entfernung der Cys-Seitenkette und der tBu-Schutzgruppe

Cys(tBu)Normalerweise sind TFA und I2 relativ stabil und werden daher häufig zur Kombination verwendet, um Peptide mit dem dritten Disulfidbindungspaar und höher herzustellen, ohne die vorherigen Disulfidbindungspaarungen zu stören.
TBu entfernen Die Methoden umfassen normalerweise Quecksilberacetat und Trichlormethylsilan/Diphenylsulfoxid-Methode.
Im Folgenden finden Sie eine Einführung in die Schritte der Quecksilberacetat-Methode:

1. Bringt tBu der in Eis gelösten Peptide in TFA-Mittel (5-10 mg/ml)
2. Geben Sie das 10-fache Äquivalent Quecksilberacetat hinzu und rühren Sie 3 Stunden lang.
3. Unter reduziertem Druck drehen, um überschüssiges TFA zu verdampfen, in 10 %iger wässriger Essigsäurelösung auflösen
4. Fügen Sie das 20-fache Äquivalent Mercaptoethanol hinzu und lassen Sie es 5 Stunden lang ruhen
5. Zentrifuge zur Entfernung des Niederschlags und anschließende Entsalzung oder HPLC-Reinigung.